Methoden des Gentransfers - [Vektoren, Plasmide, Transformation] - [Gentechnik, 4/7]
TeacherToby
https://www.youtube.com/watch?v=VFoh_qMAHBc

Transkript (automatisch erstellt)

0:08 in diesem video welches eingebettet ist und eine video reihe zum thema gentechnik geht es um methoden des
0:14 geldtransfers wir schauen uns also an wie ein fremdes gen von einem organismus in eine zielzelle eines anderen
0:22 organismus übertragen transferiert wird erinnert euch gene sind abschnitte auf der dna die die information für die
0:30 synthese eines bestimmten proteins enthalten und proteine können wiederum für die ausprägung von merkmalen
0:36 verantwortlich sein es gibt gene die die proteine synthetisieren die von so großen biologischen nutzen sind dass man
0:44 diese gene auf eine zielzelle transferiert mit dem ziel eine hohe anzahl von kopien des gewünschten gens
0:51 herzustellen man sagt auch das gehen zu clown ihren und das gehen wiederum stellte bei den prozess der protein
0:58 biosynthese das gewünschte protein her als beispiel kann das insulin gehen genannt werden eingehen welches das
1:04 protein insulin codiert das den blutzuckerspiegel reguliert es gibt einige menschen die an der
1:11 zuckerkrankheit diabetes leiden weil sie nicht ausreichend insulin produzieren durch den transfer des menschlichen
1:18 insulin gehens auf ein bakterium als ziel organismus war es möglich insulin in so großem maßstab herzustellen dass
1:26 es diabetes erkranken zb in spritzen form verabreicht werden kann und diese so dass ihn auf natürliche weise fehlen
1:33 insulin künstlich substituieren bzw ersetzen um ein gehen in eine geeignete wirtszelle beziehungsweise zielzelle zu
1:42 übertragen und so eine transgener zelle also eine gentechnisch veränderte zellen zu erzeugen wird in der regel ein
1:49 transport molekül ein sogenannter vector benötigt in den meisten fällen verwendet man kleine dna ringe von bakterien die
1:57 man als plasmide bezeichnet als vektoren aber auch viren können als vektoren fungieren das gewünschte zu applizieren
2:05 gehen also zu vervielfältigen gehen wird in ein plasmid eingeschleust welches das gehen anschließend auf einen zielzelle
2:13 transferiert wer aus dem vorherigen video erfahren habt helfen bei diesem vorgang so genannte restriktionen zimmer
2:20 die wie molekulare scheren sind natürlich keine scheren wie hier dargestellt die dna beider organismen an
2:28 spezifischen stellen schneiden können während das plasmid in der regel nur einmal geschnitten wird wird die in
2:35 diesem beispiel von menschen stammende spender dna so geschnitten dass mindestens zwei dna fragmente entstehen
2:43 und sich das dna fragment mit dem gewünschten game anders plasmid anheften kann und so
2:49 rekombinante dna entsteht neu kombinierte dna also die die genetische information aus mindestens zwei
2:57 unterschiedlichen ursprüngen enthält plasmide verfügen über eine reihe von merkmalen die sie zu geeigneten gehen
3:03 taxis machen so enthält ein plasmid normalerweise eine oder mehrere erkennung sequenzen
3:09 für restriktionen im zimmer erst die erkennung sequenzen erlauben ist restriktion enzymen am plasmid zu binden
3:17 und an diesem zu schneiden aufgrund dieser stellen es ist einfach zusätzliche dna zum beispiel das insulin
3:23 gehen in das plasmid einzufügen viele plasmide enthalten gene die eine resistenz gegen antibiotika aufweisen
3:31 beispielsweise trägt ein plasmid gene für eine resistenz gegen am pc und gegen tetracyclin wie jedes lebewesen müssen
3:39 auch bakterien über mechanismen verfügen mit denen sie sich ihrer feinde erwehren können antibiotika welche eingesetzt
3:47 werden bei bakteriellen infektionen um bakterien abzutöten stellen einen großen feind für bakterien nicht verwunderlich
3:55 also dass bakterien im laufe der evolution resistenzen gegen einige antibiotika entwickelten die beiden gene
4:02 für die antibiotikaresistenzen werden genutzt um das vorhandensein von rekombinanter dna nachzuweisen um also
4:10 zu prüfen ob das insulin gehen tatsächlich in den sektor aufgenommen wurde oder nicht auch wenn viele wurzeln
4:18 bzw zielzellen mit einem vector in kontakt kommen neben nur wenige zellen den vektor tatsächlich auf und auch das
4:26 war knüpfen des fremden gehens mit der mit dem erfolgten nicht immer fehlerfrei so dass nicht alle vektoren die fremd
4:33 dna enthalten wie genau die selektion transgener zellen erfolgt ist gegenstand eines weiteren videos was ich an dieser
4:41 stelle einmal ein blender so viel sei an dieser stelle gesagt plasmide lassen sich künstlich so modifizieren dass sie
4:48 eine erkennung sequenz für ein restriktion sands im aufweisen die innerhalb eines der beiden antibiotika
4:55 resistenzgene liegt sollte das plasmid nun tatsächlich das fremde gehen aufgenommen haben zum beispiel innerhalb
5:02 des ambitiösen resistenz gehen würde die resistenz gegenüber des arzneistoffs ampicillin verloren gehen klar denn das
5:11 gehen es infolge der integration der fremde dna komplett verändert so dass es kein gen produkt nämlich die resistenz
5:20 gegenüber ampicillin herstellen kann das geht für tetracyclin resistenz hingegen wäre weiterhin intakt
5:28 diejenigen platzmiete die auf einem nährmedium mit tetracyclin wachsen weil sie aufgrund des funktionsfähigen
5:35 tetracyclin resistenz gens gegen diesen feind resistent sind aber auf einem nährmedium mit ampicillin kein wachstum
5:44 zeigen haben das fremdgehen in sich integriert die inaktivierung des am pc in gehens kennzeichnet also das einen
5:52 gentransfer stattgefunden hat nicht umsonst werden die beiden resistenzgene auch reporter gene genannt denn wie
5:59 reporter berichten sie vom vorhandensein rekombinanter dna in der betreffenden zelle etwa eine von 10.000 zellen nimmt
6:09 ein plasma dorf umso wichtiger diese wenigen zellen mithilfe der reporter kindern selektieren zu können neben den
6:17 erkennung sequenzen für restriktionen enzyme und den reporter geben erzählt jedes plasmid ein replikations ursprung
6:24 bei dem einschleusen des plasmid und eine würzige besteht die aufgabe nicht allein darin die dna in die zelle zu
6:30 bringen sondern zu erreichen dass sie dna repliziert verdoppelt wird wenn sich die zelle zeit denn nur so kann
6:38 gewährleistet werden dass das plasmid mitsamt fremd insulin gehen auch in den tochterzellen enthalten ist und clown
6:46 irrt werden und eine möglichst große anzahl von kopien des gewünschten gehens hergestellt werden kann so dass auch das
6:54 gen produkt das protein insulin in großem umfang produziert wird deshalb muss das plasmid ein replikations
7:01 ursprung enthalten an dem die dna polymerase binden kann welche anschließend das plasmid repliziert an
7:09 dieser stelle sei kurz zu erwähnen dass die produktion eines proteins in großen mengen drews bei insulin zb der fall ist
7:16 nicht das einzige ziel des gen transfers sein muss auch die analyse des gehens oder die erzeugung eines organismus mit
7:24 einem neuen phänotypen einem neuen erscheinungsbild können als jedes gen transfers verfolgt werden wie schon
7:31 erwähnt können auch viren als vektoren fungieren sie spielen beispielsweise beim gentransfer oft erzählen und vor
7:38 allem bei der menschlichen gen therapie eine große rolle wie im video zur gentherapie noch genauer erfahren werdet
7:44 die eigenschaft von viren zellen auf natürliche weise zu infizieren indem sie ihre dna in diese injizieren bieten sie
7:53 einen entscheidenden vorteil gegenüber plasmide als vektoren im gegensatz zu plasmide sind bei viren keine
7:59 künstlichen maßnahmen erforderlich um sie in eine wirtszelle zu schleusen ein paar wenige sätze noch zur direkten
8:06 gegen übertragung als alternative wird zum indirekten transfer des fremden gehens durchweg toren es gibt
8:13 vielfältige künstliche methoden rekombinante dna direkt in die zielzelle zu transferieren ein verfahren ist die
8:20 elektro operation bei der mit hilfe eines kurzen elektrischen schocks kurzzeitig poren in die plasma membran
8:27 erzeugt werden durch welche die dna in die zelle gelangen kann eine weitere methode ist die nutzung von gehen kann
8:34 ohne hier werden winzige partikel welche die dna tragen auf die wirtszellen geschossen aber auch die plasma membran
8:43 lässt sich chemisch so behandeln dass sie durchlässiger wird und die dna in die zelle fundieren kann
8:52 [Musik]